熒光顯微鏡概述

熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡不同，它不是通過普通光源的照明觀察標(biāo)本，而是利用一定波長的光（通常是紫外光或藍(lán)紫光）激發(fā)顯微鏡下標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)，使之發(fā)朗熒光，呈現(xiàn)熒光映像。所以，熒光顯微鏡的光源所起的作用不是直接照明，而是作為一種激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)的能源。我們之所以能觀察標(biāo)本，不是由于光源的照明，而是標(biāo)本內(nèi)熒光物質(zhì)吸收激發(fā)光的光能后所呈現(xiàn)的熒光映像。

由此可如，熒光顯微鏡的特點，主要是它的光源能供結(jié)大量特定波長范圍的激發(fā)光，使受檢標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)能獲得必要強度的激發(fā)光。同時，熒光顯微鏡必須具有相應(yīng)的濾片系統(tǒng)。一組濾片安裝在激發(fā)光源和顯微鏡之間的光路中，它們可選樣性地使激發(fā)光源的特定波長范圍的光通過，作為激發(fā)光，這種濾片稱為激發(fā)濾片。一組濾片安裝在目鏡和物鏡之間的光路中，這組濾片允許熒光通過，但吸收視野內(nèi)未轉(zhuǎn)化為熒光的激發(fā)光，從而保護觀察吝的眼睛。這種濾片稱為阻斷濾片或吸收濾片。

此外，還有吸熱底片和吸收紫外線濾片，吸收光源的熱量和吸收紫外光允許可見光通過。這兩種濾片也安裝在光源和顯微鏡之間的光路中。后者吸收紫外光允許可見光（白光）通過，這樣使茨光顯微鏡可作為普通顯微鏡使用。由于熒光顯微鏡光源的光度強，一般均附有不同強度的小性灰濾片，可減弱光源約強度。團此，熒光顯微鏡包括光源、濾片系統(tǒng)和顯微鏡三個部分（圖3）。

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