共聚焦顯微鏡的簡介
從一個(gè)點(diǎn)光源發(fā)射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上,如果物體恰在焦平面的二倍焦點(diǎn)上,那么反射光通過原透鏡應(yīng)當(dāng)匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦,簡稱共焦。其意義是:通過移動(dòng)透鏡系統(tǒng)可以對(duì)一個(gè)半透明的物體進(jìn)行三維掃描。共聚焦顯微鏡能提供無比的三維成像,以及對(duì)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和動(dòng)力學(xué)過程的測試。
激光掃描共聚焦顯微鏡是二十世紀(jì)80年代發(fā)展起來的一項(xiàng)具有劃時(shí)代的高科技產(chǎn)品,它是在熒光顯微鏡成像基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理,把光學(xué)成像的分辨率提高了30%--40%,使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針,從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖像,在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+、PH值,膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化,成為形態(tài)學(xué),分子生物學(xué),神經(jīng)科學(xué),藥理學(xué),遺傳學(xué)
等領(lǐng)域中新一代強(qiáng)有力的研究工具。激光共聚焦成像系統(tǒng)能夠用于觀察各種染色、非染色和熒光標(biāo)記的組織和細(xì)胞等,觀察研究組織切片,細(xì)胞活體的生長發(fā)育特征,研究測定細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸和能量轉(zhuǎn)換。能夠進(jìn)行活體細(xì)胞中離子和PH值變化研究(RATIO),神經(jīng)遞質(zhì)研究,微分干涉及熒光的斷層掃描,多重?zé)晒獾臄鄬訏呙杓爸丿B,熒光光譜分析熒光各項(xiàng)指標(biāo)定量分析熒光樣品的時(shí)間延遲掃描及動(dòng)態(tài)構(gòu)件組織與細(xì)胞的三維動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)構(gòu)件,熒光共振能量的轉(zhuǎn)移的分析,熒光原位雜交研究(FISH),細(xì)胞骨架研究,基因定位研究,原位實(shí)時(shí)PCR產(chǎn)物分析,熒光漂白恢復(fù)研究(FRAP),胞間通訊研究,蛋白質(zhì)間研究,膜電位與膜流動(dòng)性等研究,完成圖像分析和三維重建等分析。
共聚焦顯微鏡的應(yīng)用領(lǐng)域
涉及醫(yī)學(xué)、動(dòng)植物科研、生物化學(xué)、細(xì)菌學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、組織胚胎、食品科學(xué)、遺傳、藥理、生理、光學(xué)、病理、植物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、海洋生物學(xué)、材料學(xué)、電子科學(xué)、力學(xué)、石油地質(zhì)學(xué)、礦產(chǎn)學(xué)。